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        文件名稱:  如何將多肽溶解在DMSO中?
        公司名稱:  合肥合生生物科技有限公司
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        文件詳細(xì)說明:
       

      如何將多肽溶解在DMSO中?


      二甲基亞砜(DMSO)是一種含硫有機(jī)化合物,分子式為(CH3)2SO,常溫下為無色無臭的透明液體。DMSO作為冷凍保護(hù)劑經(jīng)常應(yīng)用于細(xì)胞庫。在細(xì)胞冷凍過程中,DMSO可防止胞內(nèi)/胞外晶體的形成,其工作濃度為10%。DMSO通常可與鹽或血清白蛋白結(jié)合。



      疏水性多肽可以很容易地溶解在DMSO中。但DMSO可增加細(xì)胞的通透性,若多肽溶解于DMSO中則會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用。高濃度的DMSO絕不可應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)中。濃度為5%的DMSO即可讓細(xì)胞膜溶解。大多數(shù)細(xì)胞株可以容忍0.5% DMSO,少許可以容忍1%的濃度,而不表現(xiàn)出嚴(yán)重的細(xì)胞毒性。然而原代細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)其更敏感。所以如果是用原代細(xì)胞做劑量/反應(yīng)曲線(可行性),其濃度應(yīng)低于0.1%。



      對(duì)于某些疏水性非常高的多肽,可先嘗試將其溶解在少量的DMSO(30-50ul,100%)中,然后慢慢 (一滴一滴地)將其添加到不斷攪拌的水溶液如PBS或其他想要的緩沖液中,直至理想濃度。如果滴加過程中,肽溶液開始變渾濁,說明已經(jīng)達(dá)到了溶解極限。另外,超聲波有助于多肽溶解。



      經(jīng)驗(yàn):


      對(duì)幾乎所有的細(xì)胞來說,濃度為0.1%DMSO是**的。

      廣泛被用于細(xì)胞培養(yǎng)的DMSO終濃度為0.5%,不會(huì)引起細(xì)胞毒性。

      雖然對(duì)部份細(xì)胞來說,1%DMSO也不會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性,但我們推薦0.5%。

      也有5%DMSO成功地應(yīng)用于某些細(xì)胞的案例。

      始終保持終濃度在0.5%,但儲(chǔ)存時(shí)可200倍高濃度溶于100%的DMSO中。

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