多肽修飾

       多肽是生物體內實現各種功能的活性物質，多肽修飾主要是肽鏈主鏈結構和側鏈基團的修飾。通過修飾能夠改變肽

類化合物的物理化學性質，優化其在體內的有效利用。經過修飾的多肽類藥物，能夠顯著降低免疫原性、減少毒負作用、

增加水溶性、延長體內作用時間、改變體內分布狀況等等。常見的肽修飾包括：C末端修飾、N末端修飾、中間殘基修飾，

以及環化修飾。

     

      除了常規線性肽之外，合生生物（Synthbio）現足以滿足您對多種環肽、修飾肽和特殊肽的需求，包括：N/C端修

飾、抗原肽、熒光標記、環肽、生物素標記和PEG化等。合生生物提供的多肽修飾（peptide modification）服務包含

但不局限于以下類型：

☆N端修飾/C端修飾	☆二硫鍵修飾	☆酰胺鍵成環
☆熒光標記	☆生物素標記多肽	☆載體蛋白偶聯和MAPs
☆非天然氨基酸/D型氨基酸	☆磷酸化修飾和磺酸化修飾	☆Linker,spacers PEGylation
☆穿膜肽

1、酰胺化和乙酰化

如果合成多肽為蛋白質的內部序列，通過N端乙酰化或C端酰胺化可以去除多肽電荷使其更趨向于蛋白質的自然結構，同時增強了多肽對肽鏈內切酶的抵抗力。

2、生物素及FITC標記

Biotin/Fitc一般直接修飾在多肽的N端，為了有效的標記N端，可在多肽的N端和熒光基團之間插入七碳的6-氨基己酸。Lys(Fitc)/Lys(Biotin)修飾在多肽的C端，這樣就消除了賴氨酸的正電荷。

3、二硫鍵修飾

在半胱氨酸殘基間形成二硫鍵可以實現多肽環化，但由于二硫鍵是隨機形成的，因此對于含多個半胱氨酸殘基的多肽來說，這是個挑戰。合生生物可在指定的半胱氨酸間構建定點二硫鍵，合生生物成功在一條多肽定位引入三對二硫鍵。同時不同序列之間形成多肽二硫鍵，例如胰島素的合成。我們也有非常豐富的經驗。

4、多種磷酸化

多肽磷酸化可以幫助研究磷酸化對多肽和蛋白結構的影響以及蛋白激酶的作用機理，對于序列中含有多個含羥基的氨基酸（S,T,Y），可以通過正交保護或使用被Fmoc保護的磷酸化氨基酸原料來實現序列中磷酸化氨基酸的選擇性。合生生物已經成功地為客戶合成了多磷酸化修飾多肽。

5、甲基化修飾

蛋白質的甲基化被認為是一種重要的修飾，有助于調節細胞功能，如轉錄、細胞分裂和細胞分化。甲基化修飾蛋白的多肽可用于蛋白質-蛋白質相互作用研究、或X射線晶體學結構測定。合生生物可以合成含有單個、二個、三個甲基化賴氨酸的多肽。

6、KLH, BSA,OVA多肽偶聯

多肽抗原由于分子太小而不能產生顯著的免疫反應，因此需要將多肽抗原偶聯到BSA、OVA、KLH等較大的蛋白載體上。KLH由于在ELISA或Western blotting檢測中沒有抑制作用，所以不影響檢測結果。常用的偶聯原理是馬來酰亞胺法，即將多肽中的半胱氨酸殘基與載體蛋白偶聯。因此合成抗原多肽時，在其N端或C端添加一個半胱氨酸殘基有利于多肽與載體蛋白的偶聯。

注：KLH是一種很大的凝聚蛋白，由于它特殊的大小及結構，其水溶性有限，往往樣品會呈現溶液狀或者含絮狀的混懸液，但這并不影響免疫原性。

7、聚乙二醇（PEG）修飾 

PEG聚合體具有非離子性的、無毒性的、無生物排斥、高親水性的等，PEG修飾通過化學方法將PEG聚合物偶聯到大分子上（抗體、多肽等）。PEG修飾的大分子具有較高的溶解性及生物藥效，可通過偽裝多肽,騙過宿主細胞的免疫系統，來增強多肽的治療效果。它也可以通過降低腎臟清除率來延長多肽的代謝時間。

8、穩定同位素標記

為了進行核磁共振實驗，合生生物將多肽標記穩定的非放射性的同位素。標記2H、15N、13C或15N及13C同時標記的多肽，合成后可以便于核磁共振檢測。如果您需要標記修飾，請提供您的序列及標記需求。

9、復合抗原肽修飾

多抗原肽（Multiple-Antigen peptide, MAP）是生產高效價的抗多肽抗體和多肽疫苗的一種有效方法。根據賴氨酸的數目，可以合成不同數目側鏈的多抗原肽，這樣不必將抗原偶聯到載體蛋白質便能產生高滴度、高親和力的抗體。

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